114學年度分科測驗考試第四科為生物，有1萬4,953人報考，到考率89.63%。高中生物老師們認為，今年生物試題難易適中、鑑別度高。
臺北市高中生物科教師群建中劉玉山老師、周麗芬老師，與新北高中沈家玉老師表示，今年試題難易適中，鑑別度高，測驗學生各章節生物學重要概念，尤其注重科學史及研究方法，是今年試題最大的特色，像是第11、12題及閱讀三的26到28題。
老師們表示，試題取材各冊平均，與去年側重選修生物3明顯不同，各章節也平均分配，與選修生物4相關的生態學內容比起去年比例提升不少。
老師們指出，圖表題共19題，比去年少1題，整體考核能力與往年相同，主要希望學生需具備各章節的核心知識，再融入分析、歸納、整合及實驗探究能力，也側重判圖能力、閱讀、擷取資訊及科學研究方法，大部分考題仍屬於科學素養題。但今年的試題中也出現不少記憶性知識題，尤其是非選擇題45到49題。今年沒有時事題是比較可惜的部分。
在實驗題部分，第33題有關青蛙解剖實驗，學生必須有實際觀察操作經驗才有利於作答。